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    一文解析Alega-Phenomenex色谱柱的正确使用方法

    发布时间: 2022-03-28  点击次数: 326次
      Alega-Phenomenex色谱柱是什么?它的正确使用方法是怎样的?相信很多人都不太了解,那么,今天就给大家介绍一下Alega-Phenomenex色谱柱的正确使用方法!
     
      1.加装保护柱
     
      保护柱的作用是过滤掉来自流动相和样品的化学“拉圾”同时也可以有效除去流动相和样品中的不溶物。因此,加装保护柱是必要的,特别是在分析中药、中成药等复杂混合物和生物样品时更是保护分析柱的措施。
     
      2.过滤流动相和样品
     
      流动相通常由水或缓冲溶液与有机溶剂混合而成,原则上,所有经过色谱柱的流动相均应过滤,但在实际操作上应视具体情况而有所区别:当有机溶剂用色谱纯级,水用石英亚沸水或其它超纯水时,在能确保水和有机溶剂的质量且没有受到污染时,过滤并无更多实际意义。
     
      3.净化样品
     
      当样品中含有对色谱柱有损害的化学成分,如产生吸附的蛋白质、糖等有机分子和强吸附性物质,以及可能对柱填料产生破坏作用的基团离子。
     
      4.避免过高的柱压
     
      虽然高效液相色谱柱能耐受的压力值大,但过高及过大的压力变化均会缩短色谱柱的寿命,避免的方法是柱压过高时,尽可能采用较小的流速,以不超过柱最大允许压力的一半为宜。
     
      5.注意温度和酸碱度
     
      一般以硅胶为基质的色谱柱最高使用温度不超过60℃,以低于40℃为宜,特别是在流动相pH接近使用限度时,更应降低使用温度。
     
      6.正确及时的冲洗
     
      试验结束后,要及时用适当的溶剂冲洗系统并最终过渡到纯甲醇冲洗,对于含有缓冲盐的流动相,办法是先用与分析用流动相组成*相同但不含缓冲盐的溶液进行冲洗,再逐步过渡到纯甲醇冲洗。
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